人雄激素受體 (AR) ELISA 試劑盒對溫育的時間和溫度有著嚴格的要求。所有試劑在使用前必須達到室溫 20 - 25℃,這一溫度范圍能夠確保試劑的活性和反應的準確性。例如,有研究表明,在該溫度范圍內進行溫育,能夠使檢測結果的準確性提高到 90% 以上。使用后立即冷藏保存試劑,可以有效延長試劑的使用壽命,同時保持其活性。
嚴格按照規(guī)定的時間進行溫育也是至關重要的。不同的步驟可能需要不同的溫育時間,如在加入標準品及檢測樣本到反應孔中后,封板后于 37℃孵箱孵育 90min,加入化抗體工作液后溫育 60min,加入酶結合物工作液后溫育 30min 等。這些時間的設定是經(jīng)過大量實驗驗證的,能夠確保反應充分進行,從而得到準確的結果。
如果不嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育,可能會導致不準確的結果。例如,溫育時間過長可能會使反應過度,導致結果偏高;溫育時間過短則可能使反應不充分,結果偏低。溫度過高或過低也會影響試劑的活性,從而影響檢測結果。
為了確保溫育操作的規(guī)范性,在實驗過程中應使用精確的溫育設備,如恒溫箱。同時,要定期對溫育設備進行校準,以確保溫度的準確性。在溫育過程中,還應避免頻繁打開溫育設備,以免影響溫度的穩(wěn)定性。
二、洗板操作不容忽視
洗板不正確會致結果不準確,加底物前盡量吸干孔內液體,防止微孔干燥。
洗板操作在人雄激素受體 (AR) ELISA 試劑盒的使用過程中至關重要。如果洗板不正確,會導致不準確的結果。例如,在進行手工洗板時,若未能吸去或甩掉酶標板內的液體,或者在浸泡孔內時時間不足、注入的洗滌液量不夠等,都可能使殘留的雜質影響后續(xù)反應,從而導致結果出現(xiàn)偏差。有實驗數(shù)據(jù)表明,洗板可能使結果的誤差率增加 20% 以上。在加入底物前,一定要確保盡量吸干孔內液體,這是因為殘留的液體可能會與底物發(fā)生非特異性反應,影響結果的準確性。同時,溫育過程中要防止微孔干燥,一旦微孔干燥,可能會使試劑在孔壁上的分布不均勻,從而影響反應的進行。
為了確保洗板操作的正確性,可以采用手工洗板和自動洗板機洗板兩種方法。手工洗板時,要嚴格按照操作步驟進行,先吸去或甩掉酶標板內的液體,然后在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,將酶標板朝下用力拍幾次,再將推薦的洗滌緩沖液至少 0.3ml 注入孔內,浸泡 1 - 2 分鐘,根據(jù)需要重復此過程數(shù)次。
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